癌变·畸变·突变 ›› 2004, Vol. 16 ›› Issue (1): 5-8.doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2004.01.002
许丽艳;李恩民;蔡唯佳;沈忠英;曾 毅
XU Li-yan, LI En-min, CAI Wei-jia , et al
摘要: 背景与目的:构建NGAL 基因5’侧翼区转录调控元件萤火虫荧光素酶报告基因表达载体。材料与方法:以PCR法从SHEEC食管癌细胞基因组DNA中扩增NGAL基因5’侧翼转录调控区不同长度片段G0~G6(-1431~+84)。 PCR产物经pGEM-T easy转载,再定向亚克隆插入pGL3-Basic。重组子通过特异限制性内切酶切割,琼脂糖电泳予以鉴定。结果:成功构建NGAL 基因5’侧翼区转录调控元件萤火虫荧光素酶报告基因表达载体7个,pGLB-G0~G6。结论:为借助于双荧光素酶报告基因检测系统研究确定NGAL基因5’侧翼转录调控区转录调控元件的分布特点以及转录调控元件与转录调控蛋白之间相互作用的性质提供了基本实验条件。